<tt id="y8yyy"><table id="y8yyy"></table></tt>
<tt id="y8yyy"></tt>
  • <tt id="y8yyy"><rt id="y8yyy"></rt></tt>
  • <tt id="y8yyy"><rt id="y8yyy"></rt></tt>
    <li id="y8yyy"></li>
    <li id="y8yyy"></li>
  • Call: 400-600-3979 | Email: service@beaverbio.com

    市場(chǎng)活動(dòng)

    Oligo dT磁珠:多功能核酸捕獲工

    應用場(chǎng)景一:mRNA純化

     

    mRNA是一類(lèi)攜帶遺傳信息且能指導蛋白質(zhì)合成的單鏈核糖核酸,滿(mǎn)足合成各種蛋白質(zhì)的所有遺傳信息的要求。許多研究發(fā)現,mRNA可作為許多疾病診斷的工具,包括腫瘤、胃腸道疾病、心血管疾病、關(guān)節炎、中樞神經(jīng)系統疾病等。

     

    mRNA序列由5個(gè)關(guān)鍵結構元件組成:5'帽結構(Cap)、5'非翻譯區(UTR)、編碼區(CDS)、3'非翻譯區(UTR)和poly(A)尾巴。(圖1)

      

    圖1.mRNA結構示意圖

     

    Oligo dT磁珠是最常用的mRNA捕獲載體之一,其表面的oligo dT與真核生物mRNA的poly A尾互補配對,能夠快速高效地從總RNA、細胞裂解物或帶有poly A尾的體外轉錄RNA樣本中分離純化mRNA,下游應用于PCR檢測和建庫測序。

     

    圖2.mRNA的qPCR或建庫測序檢測流程圖

     

     

    應用場(chǎng)景二:核酸探針捕獲

     

    Oligo dT磁珠的另一類(lèi)廣泛應用,即固定poly(A)標記的核酸探針,進(jìn)行目標序列核酸捕獲,下游應用于qPCR檢測。

    圖3.目標核酸的qPCR檢測流程圖

     

    核酸探針和磁珠固定的方法有共價(jià)、親和作用、堿基互補配對、離子或偶極作用等方式,根據用于場(chǎng)景不同各有優(yōu)缺點(diǎn)。目前也有一些分子診斷試劑開(kāi)發(fā)企業(yè)選擇oligo dT磁珠作為核酸探針固定的載體。

     

    表1. 磁珠表面核酸探針固定的技術(shù)之間的比較


    Oligo   dT-poly A

    堿基互補配對系統

    SA-biotin

    親和系統

    共價(jià)固定系統

    探針修飾

    Poly A

    生物素

    NH2

    磁珠

    Oligo dT磁珠

    SA磁珠

    羧基磁珠

    優(yōu)點(diǎn)

    技術(shù)門(mén)檻低

    特異性高

    穩定性好

    技術(shù)門(mén)檻低

    反應速度快

    非特異吸附少

    成本低

     

    缺點(diǎn)

    成本略高

    探針需要poly A標記

    成本略高

    探針需要生物素標記

    技術(shù)門(mén)檻高

     


    一些分子診斷技術(shù)是利用oligo dT磁珠固定肽-寡核苷酸,分離純化血清中HBV DNA。研究結果顯示oligo dT磁珠的靈敏度比常規方法的靈敏度高100倍,且核酸的完整好,實(shí)驗結果重復性高CV達到0.05%。

     

    磁珠推薦

    BeaverBeads? Oligo(dT)磁珠表面共價(jià)偶聯(lián) Oligo(dT),可高效地從真核生物總RNA或直接從動(dòng)植物組織或細胞裂解物中快速分離出完整、高純度的mRNA;也可固定poly(A)標記的核酸探針,用于目標序列核酸的捕獲

    分離得到的mRNA和靶標核酸可用于多種分子生物學(xué)實(shí)驗:RT-PCR、固相cDNA 文庫構建、RACE、Northern等。

    產(chǎn)品特點(diǎn):

    a)    表面活性位點(diǎn)豐富,mRNA捕獲效率高

    b)    表面特殊封閉,非特異性吸附低

    c)    超順磁性微球,可配套自動(dòng)化設備實(shí)現高通量操作

    d)    工業(yè)化規模生產(chǎn),批次穩定

    圖4.oligo dT磁珠結構示意圖

     

    mRNA純化數據:

    樣本:人細胞Total RNA

    上樣量:300ng Total RNA

    磁珠用量:20-50uL

    實(shí)驗結果:


    靶標

    磁珠

    Mean Ct

    GAPDH mRNA

    進(jìn)口品牌

    22.56

    BEAVER

    22.62

    18S rRNA

    進(jìn)口品牌

    26.06

    BEAVER

    26.19

     

    實(shí)驗操作過(guò)程中,BeaverBeads Oligo (dT)磁珠的懸浮性與進(jìn)口品牌相當。從人細胞total RNA樣本中純化mRNA,采用熒光定量PCR對樣本進(jìn)行定量檢測,對mRNA(特異性)和sRNA(非特異性)檢測的Ct值偏差<0.1,兩品牌磁珠無(wú)明顯差異。

     



    產(chǎn)品名稱(chēng)

    貨號

    規格

    載量

    應用給推薦

    BeaverBeads? Oligo(dT)

    70431

    1μm,5mg/mL

    >2μg mRNA/mg磁珠

    mRNA捕獲、mRNA疫苗加尾分布檢測

    核酸探針捕獲

     

     

    更多技術(shù)細節和數據可聯(lián)系我們獲取。

     


    人妻无码一区二区不卡无码AV_久久久久久久波多野结衣高潮_中文字幕久久久久人妻中出_寂寞少妇被猛烈进入在线兔费观看