行業(yè)動(dòng)態(tài)

黃曲霉毒素前處理方法如上圖所示，但目前的前處理方法普遍存在操作步驟繁瑣，樣品損失嚴重，耗時(shí)長(cháng)，且需要消耗大量的有機溶劑，回收率不高等問(wèn)題。

在上一版的標準中采用免疫親和柱凈化法，基于免疫親和的原理來(lái)實(shí)現凈化除雜，雖然能夠實(shí)現較好的凈化效果，但是該方法的成本較高，難以被實(shí)驗室普及使用。因此亟需建立一種快速、準確、方便的黃曲霉毒素前處理凈化方法，有利于監控食品、調味品、飼料和茶葉中黃曲霉毒素的含量，從而保障食品安全。

標準頒布

為了滿(mǎn)足當前國內糧油檢測、監測定量分析的要求，2020年7月，國家糧食和物資儲備局發(fā)布的《LS/T 6138-2020 糧油檢驗糧食中黃曲霉毒素的測定免疫磁珠凈化超高效液相色譜法》標準開(kāi)始正式實(shí)施。該標準擬利用免疫磁珠的凈化，基于液相色譜檢測，建立一種高通量、快速、重復性好、易于自動(dòng)化的黃曲霉毒素精準定量分析方法。

標準編制說(shuō)明中指出：使用免疫磁珠法進(jìn)行樣本處理既能保留免疫親和柱良好的凈化效果和穩定性，又能夠減低操作難度，減少操作時(shí)間和勞動(dòng)強度，易于自動(dòng)化處理。

標準看點(diǎn)之磁珠新用

標準看點(diǎn)1：檢測項目、原理及檢出限

標準適用于小麥、玉米、稻谷和植物油等糧油樣品中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2（AFB1、AFB2、AFG1、AFG2）的測定。各類(lèi)物質(zhì)檢出限如下表。

標準中規定了免疫磁珠凈化超高效液相色譜測定糧食中黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2（AFB1、AFB2、AFG1、AFG2）的原理、試劑和材料、儀器和設備、分析步驟、測定、結果計算和精密度等內容。

黃曲霉毒素檢出限一覽表

檢測原理

2. 新舊標準樣品前處理方法對比

免疫親和柱凈化法樣本處理流程圖

免疫磁珠凈化法樣本處理流程圖

從兩張流程圖對比可發(fā)現：

采用免疫親和柱凈化法對于樣本處理需要精提后進(jìn)行凈化，操作步驟繁瑣，樣品損失嚴重，耗時(shí)長(cháng)，且需要消耗大量的有機溶劑，污染大；而采用免疫磁珠凈化法樣本處理只需粗提，且步驟簡(jiǎn)單易操作，耗時(shí)也較短；這一新標準的頒布，無(wú)疑是對食品安全檢驗更有效率的保障。

3. 標準中對免疫磁珠的性能要求

免疫磁珠與樣品稀釋液的反應時(shí)間是磁珠凈化的關(guān)鍵，將免疫磁珠與濃度為5μg/kg黃曲霉毒素B1標準溶液反應，分別考察不同反應時(shí)間（1、3、5、10、15分鐘）結合效率，可以看出，反應5分鐘后磁珠吸附毒素信號基本不變，說(shuō)明5分鐘的反應時(shí)間可以滿(mǎn)足免疫磁珠反應的要求。

不同反應時(shí)間下免疫磁珠富集的AFB1含量

拓展看點(diǎn)

免疫磁珠結構示意圖

磁珠提取法通過(guò)調節緩沖液pH值，利用靜電吸附作用與磁珠實(shí)現有效結合，之后在外加電場(chǎng)的條件下，去除廢液并加以洗滌，最終實(shí)現樣本提取處理目的。

磁珠的方法避免了抽真空和高速離心等步驟，可以減少外力對樣品的損傷。該方法操作便捷，試劑簡(jiǎn)單，而且適用于在96孔板或384孔板中的高通量自動(dòng)化操作。

隨著(zhù)技術(shù)的進(jìn)步，越來(lái)越多的廠(chǎng)家開(kāi)發(fā)了不同的基于免疫磁珠提取試劑盒。磁珠表面多種多樣的化學(xué)修飾為實(shí)現復雜的實(shí)驗帶來(lái)了可能。

磁珠提取法（圖片來(lái)自網(wǎng)絡(luò )）

背景小姿勢

黃曲霉毒素（Aflatoxins，AF）是一種化學(xué)結構類(lèi)似的二氫呋喃香豆素的衍生化合物。在自然界中存在廣泛，種類(lèi)較多，主要常見(jiàn)的包括黃曲霉毒素B₁、黃曲霉毒素B₂、黃曲霉毒素G₁和黃曲霉毒素G₂. 該物質(zhì)對人畜有強烈的致病性、致癌性，嚴重危害人體健康，其中黃曲霉毒素B₁被世界衛生組織（WTO）的癌癥研究機構（IARC）劃定為I類(lèi)致癌物，其毒性是氰化鉀的10倍。

黃曲霉毒素B₁

國內外非常重視黃曲霉毒素的防控，為控制黃曲霉毒素污染的危害，國家法典委員會(huì )（CAC）和美國食品與藥品監督管理局（FDA）規定食品中黃曲霉總量不能超過(guò)15μg/kg。

GB 2761-2017 《食品中真菌毒素限量》國家食品安全標準中規定的各類(lèi)物質(zhì)限量標準

海貍免疫磁珠助力高通量和快速食品檢測

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