論文解析 | BeaverBeads? Streptavidin用于分選CD8+T細胞,純度高達95%!
以BeaverBeads? Streptavidin為分選工具,在脾和淋巴結樣本混合的單細胞懸液中,使用陰選的方式純化分選出CD8+T細胞,細胞純度高達95%!
研究背景 細胞毒性T淋巴細胞(CTL)通常稱(chēng)為CD8+T細胞,是白細胞的亞部,為一種特異T細胞,專(zhuān)門(mén)分泌各種細胞因子參與免疫作用。對某些病毒、腫瘤細胞等抗原物質(zhì)具有殺傷作用,與自然殺傷細胞構成機體抗病毒、抗腫瘤免疫的重要防線(xiàn)。Naive/靜息CD8+T細胞有驚人的能力,能擴增和分化為細胞毒性效應細胞,監視體機并清除感染。CD8+T細胞的缺失會(huì )破壞抗腫瘤免疫,增加對腫瘤生長(cháng)的敏感性。CD8+T細胞功能失調也可能引發(fā)過(guò)度的免疫反應,從而導致免疫介導的損傷或病理。因此研究CD8+T細胞的分化機制對癌癥、傳染病和自身免疫性疾病的T細胞治療具有重要應用價(jià)值。
使用BeaverBeads? Streptavidin陰選純化來(lái)自WT和C1qbp-tKO P14小鼠CD8+T細胞,通過(guò)同源CD90表達將供體細胞與宿主細胞區分開(kāi)。在感染前1天,通過(guò)尾靜脈注射5×105細胞(感染3天)、5×104細胞(感染5天)和3×104細胞(感染7天)到受體小鼠體內。在第3天和第8天,通過(guò)雙側腹腔注射,分別用2×105或5×105個(gè)單位的LCMV Armstrong菌株感染小鼠進(jìn)行實(shí)驗。
實(shí)驗流程示意圖(文章原圖)
線(xiàn)粒體磷酸化和有氧糖酵解磷酸化(OXPHOS)測試結果表明,C1qbp介導的OXPHOS增強對于CD8+T細胞分化的表觀(guān)遺傳調節是必不可少的。活化的CD8+ T細胞比活化的CD4+T細胞有更大的糖酵解和OXPHOS需求,CD8+T細胞受損OXPHOS的影響更大。
總之,研究發(fā)現C1qbp在CD8+T細胞中作為正調節因子的關(guān)鍵功能分化。通過(guò)控制與OXPHOS偶聯(lián)的代謝物,證明C1qbp有助于建立CD8+T細胞的表觀(guān)遺傳和轉錄程序,在線(xiàn)粒體代謝和CD8+T細胞之間提供了一種分化機制聯(lián)系。此外,這些代謝物補充或靶向OXPHOS可能在癌癥、傳染病和自身免疫性疾病的T細胞治療中有重要應用。
