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    市場(chǎng)活動(dòng)

    【Oligo (dT)磁珠】mRNA純化好幫手

    Oligo dT磁珠上市啦!

    目前,隨著(zhù)FDA批準了美國公司Moderna研發(fā)的新冠肺炎疫苗mRNA-1273的緊急使用授權,基于mRNA的治療方法越來(lái)越引起大家的興趣,基于mRNA的研究也越來(lái)越多,所以,如何獲得純度高,質(zhì)量高的mRNA越來(lái)越受到人們的關(guān)注。

    真核細胞的mRNA是單順?lè )醋?,其最顯著(zhù)的特征是具有5'端帽子結構和3'端的poly A的結構,此poly A結構為mRNA的提取提供了有效的途徑,人們利用堿基配對原理,開(kāi)發(fā)出寡聚(dT)纖維素或寡聚(U)瓊脂糖親和柱分離mRNA的方法,近幾年,mRNA的提取方法又有所改進(jìn)和突破,其中就有mRNA的磁珠分離純化方法。該技術(shù)主要包含2種方法,其一是用生物素標記的Oligo(dT)與mRNA3'端的poly A退火形成雜交體,然后用帶有鏈霉親和素的順磁磁珠洗滌并捕獲雜交體,形成雜交體-磁珠復合體,最后用磁架將此復合體捕獲;其二是直接用Oligo(dT)磁珠捕獲樣本中的mRNA,進(jìn)一步用無(wú)RNase無(wú)菌水洗滌,即可獲得純化的mRNA。

    接下來(lái),Dr. BEAVER就給大家介紹下1. Oligo dT磁珠的工作原理及應用。

    1. Oligo dT磁珠的工作原理及應用

    Oligo dT磁珠是一種表面共修飾了寡聚dT序列,利用磁珠表面的寡聚dT序列可以和mRNA的polyA尾之間的堿基配對,因此可以從真核總RNA或者細胞、動(dòng)植物組織等多種樣本中快速分離純度高且完整的mRNA。經(jīng)Oligo dT磁珠純化的mRNA,可應用于RT-PCR, 固相cDNA文庫構建、二代測序、Northern Blot分析、引物延伸、基因表達分析、RACE、RNA測序、親和純化、微陣列、cDNA微陣列、S1核酸酶分析、核糖體酸酶保護測定等分子生物學(xué)實(shí)驗,還可進(jìn)行mRNA疫苗的研究等。

     

     

    2. 國產(chǎn)品牌的崛起

    海貍公司專(zhuān)注于納米磁珠技術(shù)和產(chǎn)品開(kāi)發(fā)。公司10年來(lái),技術(shù)不斷迭代,已經(jīng)完成了第一代蛋白分離純化磁珠、第二代核酸純化磁珠及第三代免疫檢測磁珠的研發(fā)和規?;a(chǎn)。海貍技術(shù)團隊經(jīng)過(guò)2年多的研發(fā)和驗證,推出BeaverBeads Oligo (dT)磁珠,可用于mRNA的純化。

    BeaverBeads Oligo (dT)產(chǎn)品特點(diǎn):

    a) 表面活性位點(diǎn)豐富,mRNA捕獲效率高

    b) 非特異性吸附低,mRNA純度高

    c) 粒徑均一,懸浮性好,沉降速率低

    d) 磁響應時(shí)間短,可適用于自動(dòng)化操作

    e) 工業(yè)化規模生產(chǎn),批次穩定

     

    應用案例

    樣本:人細胞Total RNA

    上樣量:300ng Total RNA

    磁珠用量:20-50μL

    實(shí)驗結果

     

    靶標

    磁珠

    Mean Ct

    GAPDH mRNA

    進(jìn)口品牌D

    22.56

    BEAVER

    22.62

    18S rRNA

    進(jìn)口品牌D

    26.06

    BEAVER

    26.19

     

    實(shí)驗操作過(guò)程中,BeaverBeads Oligo (dT)磁珠的懸浮性與進(jìn)口品牌D相當。從人細胞total RNA樣本中純化mRNA,采用熒光定量PCR對樣本進(jìn)行定量檢測,mRNA(特異性)和sRNA(非特異性)檢測的Ct值偏差<0.1,兩品牌磁珠無(wú)明顯差異。

     

    應用案例

    樣本:植物Total RNA

    上樣量:600ng Total RNA

    磁珠用量:20-50μL

    實(shí)驗結果:

     

    靶標

    磁珠

    Mean Ct

    GAPDH mRNA

    進(jìn)口品牌D

    22.63

    BEAVER

    22.68

    18S rRNA

    進(jìn)口品牌D

    26.04

    BEAVER

    25.91

    實(shí)驗結論:BeaverBeads Oligo (dT)磁珠,懸浮性與進(jìn)口品牌D相當,從植物的total RNA樣本中純化mRNA,采用熒光定量PCR對樣本進(jìn)行定量檢測,mRNA(特異性)和sRNA(非特異性)檢測的Ct值偏差<0.15,兩品牌磁珠無(wú)明顯差異。

     

    產(chǎn)品信息

    產(chǎn)品名稱(chēng)

    BeaverBeads Oligo (dT)

    貨號

    70430

    70431

    粒徑

    2.8 μm

    1 μm

    mRNA結合量

    1-2 μg/mg磁珠

    磁珠濃度

    5mg/mL

    保存溶液

    1×PBS,0.1%v/vproclin-300

    保存條件

    2~8

    保質(zhì)期

    2年

    適用樣本類(lèi)型

    總RNA、 粗細胞樣本、動(dòng)物組織、植物組織等。

     

    全國限量50份試用裝申請鏈接


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