BeaverBeads? Protein A用于進(jìn)行免疫共沉淀和純化實(shí)驗
該研究利用BeaverBeads? Protein A對MEL 624.38細胞的MHC I-短肽復合物進(jìn)行免疫共沉淀和純化實(shí)驗，通過(guò)MHC I表征在MEL 624.38細胞上呈遞的肽并進(jìn)行MS分析，并對EA1和EA1 HL-vcMMAE的體外功效、TL-ADC的誘導細胞凋亡的活性等進(jìn)行測定，研究結果驗證了使用分選酶A產(chǎn)生的TL-ADC靶向腫瘤特異性細胞內蛋白質(zhì)的策略，無(wú)論是否存在藥物，都可以增加現有的TCR表位多肽。
浙江大學(xué)藥學(xué)院陳樞青教授等在出版于Biomaterials?8.806的利用sortase a產(chǎn)生的靶向細胞內黑色素瘤抗原MART-1的tcr樣抗體-藥物偶聯(lián)物(TL-ADCs)消除黑色素瘤中發(fā)現：
HLA I（人類(lèi)白細胞抗原 I）可以呈遞細胞內腫瘤相關(guān)蛋白的肽和細胞表面上的體細胞突變蛋白，形成HLA –短肽復合物作為T細胞受體識別的腫瘤特異性抗原。因此，，HLA介導的細胞內腫瘤抗原肽的呈遞提供了區分腫瘤細胞和正常細胞的可行方式。這對于拓展抗原選擇，尤其是對高細胞毒性的抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）具有重要的意義。
MART-1蛋白，是一種特異性識別轉移性黑素瘤的黑色素細胞分化抗原，該研究應用分選酶A介導的綴合，開(kāi)發(fā)了靶向細胞內MART-1的類(lèi)T細胞受體藥物偶聯(lián)物（TL-ADC）EA1 HL-vcMMAE。TL-ADC能夠通過(guò)特異性識別由MHC I-短肽復合物貢獻的構象表位來(lái)模擬TCR結合。因此，TL-ADC可以通過(guò)在與MHC I-短肽復合物結合時(shí)遞送高毒性試劑（例如MMAE）而特異性殺死靶向腫瘤細胞。
該研究利用BeaverBeadsTM protein A對MEL 624.38細胞的MHC I-短肽復合物進(jìn)行免疫共沉淀和純化實(shí)驗，通過(guò)MHC I表征在MEL 624.38細胞上呈遞的肽并進(jìn)行MS分析，并對EA1和EA1 HL-vcMMAE的體外功效、TL-ADC的誘導細胞凋亡的活性等進(jìn)行測定，研究結果驗證了使用分選酶A產(chǎn)生的TL-ADC靶向腫瘤特異性細胞內蛋白質(zhì)的策略，無(wú)論是否存在藥物，都可以增加現有的TCR表位多肽。
圖 純化后的MEL 624.38黑素瘤細胞的HLA-A2呈遞的肽和合成的MART-126-35 MS光譜比較
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